Leishmaniasis visceralis (VL), in subcontinente Indico kala-azar appellata, est morbus parasiticus a protozoo flagellato Leishmania causatus, qui nisi celeriter curatur, mortifer esse potest. Phlebotomus argentipes, flebotomus, solus vector VL confirmatus est in Asia Meridionali-Orientali, ubi per aspersionem residualem domesticam (IRS), insecticida syntheticum, reprimitur. Usus DDT in programmatibus coercendi VL effecit ut resistentia in phlebotomis evoluretur, ita DDT insecticida alpha-cypermethrino substitutum est. Attamen alpha-cypermethrin similiter ac DDT agit, ita periculum resistentiae in phlebotomis augetur sub accentu ob expositionem repetitam huic insecticidae. In hoc studio, susceptibilitatem culicum silvestrium et progeniei eorum F1 utens bioanalizo CDC in ampulla aestimavimus.
Culices ex decem vicis in regione Muzaffarpur Bihar Indiae collegimus. Octo vici medicamenta magnae potentiae uti perseveraverunt.cypermethrinumAd aspersionem interiorem, unum vicum cypermethrino magnae potentiae ad aspersionem interiorem uti desiit, et unum vicum numquam cypermethrino magnae potentiae ad aspersionem interiorem usus est. Culices collecti dosi diagnosticae praedefinitae per tempus definitum (3 μg/ml per 40 min) expositi sunt, et proportio deminutionis insectorum et mortalitas 24 horis post expositionem notatae sunt.
Necationis rationes culicum silvestrium variabant ab 91.19% ad 99.47%, et illae generationis F1 ab 91.70% ad 98.89%. Post viginti quattuor horas ab expositione, mortalitas culicum silvestrium variabat ab 89.34% ad 98.93%, et ea generationis F1 ab 90.16% ad 98.33%.
Eventus huius studii indicant resistentiam in *P. argentipes* evolvere posse, quod necessitatem continuae observationis et vigilantiae ad imperium conservandum postquam eradicatio perfecta est indicat.
Leishmaniasis visceralis (VL), in subcontinente Indico kala-azar appellata, est morbus parasiticus a protozoo flagellato Leishmania causatus et per morsum flebotomum feminarum infectarum (Diptera: Myrmecophaga) transmittitur. Flemboli soli vectores VL confirmati in Asia Meridionali-Orientali sunt. India prope est ad metam eliminationis VL assequendam. Attamen, ut indices incidentiae humiles post eradicationem serventur, maximi momenti est numerum vectorum reducere ad potentialem transmissionem prohibendam.
In Asia Meridionali-Orientali, culicum coercitio per aspersionem residualem intra aedes (IRS) insecticidis syntheticis utens perficitur. Secreta quiescendi ratio *Argentlegs* eam scopum idoneum ad coercendum insecticidas per aspersionem residualem intra aedes facit [1]. Aspersio residualis intra aedes dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) sub Programmate Nationali Coercitionis Malariae in India effectus significativos in coercendis populationibus culicum et significanter reducendis casibus *VL* habuit [2]. Haec coercitio *VL* improvisa Programma Indicum Eradicationis *VL* impulit ut aspersionem residualem intra aedes ut methodum primariam coercitionis *Argentlegs* adoptaret. Anno 2005, gubernationes Indiae, Bangladeshae, et Nepaliae memorandum intellectus subscripserunt cum fine eliminandi *VL* ante annum 2015 [3]. Conatus eradicationis, combinationem coercitionis vectoris et diagnosis et curationis rapidae casuum humanorum involventes, ad ingrediendum stadium consolidationis ante annum 2015 spectabant, scopo postea ad annum 2017 et deinde ad annum 2020 reviso.[4] Nova via globalis ad eliminandos morbos tropicales neglectos eliminationem *VL* ante annum 2030 includit.[5]
Cum India in phasem post-eradicationem BCVD ingrediatur, necesse est curare ne resistentia significativa beta-cypermethrino evolvatur. Causa resistentiae est quod et DDT et cypermethrin eundem mechanismum actionis habent, nempe proteinum VGSC petunt [21]. Ergo, periculum evolutionis resistentiae in phlebotomis augeri potest propter accentum causatum ex expositione regulari cypermethrino valde potenti. Ergo necesse est potentiales populationes phlebotomis resistentes huic insecticido monitorare et identificare. In hoc contextu, propositum huius studii erat statum susceptibilitatis phlebotomis silvestribus monitorare utens dosibus diagnosticis et durationibus expositionis determinatis a Chaubey et al. [20] determinatis, P. argentipes ex variis vicis in districtu Muzaffarpur Bihar, Indiae, studiaverunt, qui systemata aspersionis interioris cypermethrino tractata (vici IPS continui) continenter utebantur. Status susceptibilitatis *P. argentipes* silvestris e vicis quae systemata aspersionis interioris cypermethrino tractata desierant uti (vici olim IPS) et iis qui numquam systemata aspersionis interioris cypermethrino tractata utebantur (vici non-IPS) comparatus est per experimentum biologicum in ampulla CDC.
Decem vici ad studium selecti sunt (Fig. 1; Tabula 1), quorum octo historiam continuae aspersionis interioris pyrethroidorum syntheticorum (hypermethrini; ut vici hypermethrini continui designati) habebant et casus VL (saltem unum casum) in tribus annis proximis habuerunt. Ex duobus vicis reliquis in studio, unus vicus qui aspersionem interiorem beta-cypermethrini non in usum adhibuit (vicus non-aspersionis interioris) ut vicus controlli selectus est, et alter vicus qui aspersionem interiorem intermittentem beta-cypermethrini habuit (vicus aspersionis interioris intermittentis/olim vicus aspersionis interioris) ut vicus controlli selectus est. Selectio horum vicorum in coordinatione cum Ministerio Salutis et Turma Aspersionis Interioris et validatione Consilii Actionis Micro Aspersionis Interioris in Districtu Muzaffarpur fundata est.
Tabula geographica pagi Muzaffarpur, situs vicorum in studio inclusorum ostendens (1-10). Loci studii: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Tabula programmate QGIS (versione 3.30.3) et Open Assessment Shapefile parata est.
Ampullae ad experimenta expositionis secundum methodos Chaubey et al. [20] et Denlinger et al. [22] praeparatae sunt. Breviter, ampullae vitreae 500 mL uno die ante experimentum praeparatae sunt et paries interior ampullarum insecticida indicato (dosis diagnostica α-cypermethrini 3 μg/mL erat) applicata solutione acetonica insecticidae (2.0 mL) fundo, parietibus et operculo ampullarum. Deinde quaeque ampulla in cylindro mechanico per 30 min siccata est. Interea, operculum lente revolve ut acetonum evaporet. Post 30 min siccationis, operculum remove et ampullam rota donec omne acetonum evaporaverit. Ampullae deinde apertae ad siccandum per noctem relictae sunt. Pro quolibet experimento replicato, una ampulla, ut exemplar adhibita, 2.0 mL acetoni inducta est. Omnes ampullae per experimenta post purgationem congruentem secundum procedendi rationem a Denlinger et al. et Organizatione Mundiali Salutis descriptam [22, 23] iterum adhibitae sunt.
Postero die post praeparationem insecticidae, culices triginta ad quadraginta, capti in natura (feminae famelicae) e caveis in phialis remoti et leniter in singulas phialas insufflati sunt. Idem fere numerus muscarum pro singulis phialis insecticida obductis, incluso exemplo, adhibitus est. Hoc saltem quinquies vel sexies in quoque vico repetere. Post quadraginta minuta expositionis insecticidae, numerus muscarum deiectarum notatus est. Omnes muscae aspiratore mechanico captae, in vasis chartaceis sextarii reticulo tenui tectis positae sunt, et in incubatore separato sub iisdem condicionibus humiditatis et temperaturae cum eodem fonte cibi (globuli gossypii in solutione saccharo 30% madefacti) ac coloniae non tractatae collocatae sunt. Mortalitas viginti quattuor horis post expositionem insecticidae notata est. Omnes culices dissecti et examinati sunt ad identitatem speciei confirmandam. Eadem ratio cum muscis progenie F1 peracta est. Deiectio et mortalitas viginti quattuor horis post expositionem notatae sunt. Si mortalitas in phialis exemplorum < 5% erat, nulla correctio mortalitatis in replicatis facta est. Si mortalitas in ampulla comparationis ≥ 5% et ≤ 20% erat, mortalitas in ampullis probationis illius replicati formula Abbotti correcta est. Si mortalitas in grege comparationis 20% superavit, totus grex probationis reiectus est [24, 25, 26].
Mortalitas media culicum *P. argentipes* in silvis captorum. Vectes errorum errores normales mediae repraesentant. Intersectio duarum linearum horizontalium rubrarum cum graphio (mortalitas 90% et 98% respective) fenestram mortalitatis indicat in qua resistentia evolvere potest. [25]
Mortalitas media progeniei F1 *P. argentipes* in natura captae. Vectes errorum errores normales mediae repraesentant. Curvae duabus lineis horizontalibus rubris intersecatae (mortalitas 90% et 98% respective) ambitum mortalitatis repraesentant per quem resistentia evolvere potest [25].
Culices in vico moderatorio/sine IRS (Manifulkaha) insecticidis valde sensibiles inventi sunt. Mortalitas media (±SE) culicum silvestrium captorum 24 horis post deiectionem et expositionem erat 99.47 ± 0.52% et 98.93 ± 0.65% respective, et mortalitas media prolis F1 erat 98.89 ± 1.11% et 98.33 ± 1.11% respective (Tabulae 2, 3).
Eventus huius studii indicant pyrethoides argentopedales resistentiam contra pyrethroidem syntheticum (SP) α-cypermethrinum evolvere posse in vicis ubi pyrethroidem (SP) α-cypermethrinum regulariter adhibitum est. Contra, pyrethoides argentopedales ex vicis non ab IRS/programmate moderationis tectis collecti valde susceptibiles inventi sunt. Monitorium susceptibilitatis populationum pyrethoidum silvestrium magni momenti est ad efficaciam insecticidorum adhibitorum monitorandam, cum haec informatio in resistentia insecticidorum moderanda iuvare possit. Alti gradus resistentiae DDT regulariter in pyrethoidis ex regionibus endemicis Bihar relati sunt propter pressionem selectionis historicam ab IRS hoc insecticido utente [1].
*P. argentipes* pyrethroidis valde sensibilem invenimus, et experimenta in agro in India, Bangladesia, et Nepalia demonstraverunt IRS magnam efficaciam entomologicam habuisse cum cypermethrino vel deltamethrino coniuncta adhibita esset [19, 26, 27, 28, 29]. Nuper, Roy et al. [18] rettulerunt *P. argentipes* resistentiam pyrethroidis in Nepalia evolvisse. Studium nostrum de susceptibilitate in agro demonstravit muscas pyrethroidis argenteis e vicis non IRS expositis collectas valde susceptibiles fuisse, sed muscas e vicis IRS intermittenti/prioribus et IRS continuis collectas (mortalitas a 90% ad 97% variabat, exceptis muscis pyrethroidis ex Anandpur-Haruni, quae mortalitatem 89.34% post 24 horas post expositionem habuerunt) verisimiliter resistentes cypermethrino valde efficaci fuisse [25]. Una causa possibilis evolutionis huius resistentiae est pressio exercita ab aspersione consueta intra aedes (IRS) et programmatibus aspersionis localibus in casibus fundatis, quae sunt rationes normales ad eruptiones kala-azar administrandas in zonis/insula/vicis endemicis (Ratio Operativa Standardis ad Investigationem et Administrationem Eruptionum [30]). Resultata huius studii prima indicia evolutionis pressionis selectivae contra cypermethrinum valde efficax praebent. Infeliciter, data historica susceptibilitatis pro hac regione, obtenta utens bio-experimento CDC in ampulla, non praesto sunt ad comparationem; omnia studia priora susceptibilitatem P. argentipes observaverunt utens charta WHO insecticido imbuta. Doses diagnosticae insecticidorum in taeniis probationis WHO sunt concentrationes identificationis insecticidorum commendatae ad usum contra vectores malariae (Anopheles gambiae), et applicabilitas operativa harum concentrationum ad phlebotomos incerta est quia phlebotomi minus frequenter quam culices volant et plus temporis in contactu cum substrato in bio-experimento consumunt [23].
Pyrethroida synthetica in regionibus Nepaliae endemicis VL ab anno 1992 adhibita sunt, alternantes cum speciebus alpha-cypermethrino et lambda-cyhalothrino ad pyrethrodorum coercendos [31], et deltamethrin etiam in Bangladesia ab anno 2012 adhibitum est [32]. Resistentia phaenotypica detecta est in populationibus feris pyrethrodorum argenteopedalium in regionibus ubi pyrethroida synthetica diu adhibita sunt [18, 33, 34]. Mutatio non-synonyma (L1014F) detecta est in populationibus feris pyrethrodorum Indicorum et cum resistentia ad DDT consociata est, suggerens resistentiam pyrethroidorum oriri in gradu moleculari, cum et DDT et pyrethroidum (alpha-cypermethrin) idem gen in systemate nervoso insecti petant [17, 34]. Ergo, aestimatio systematica susceptibilitatis cypermethrini et monitoratio resistentiae culicum essentiales sunt per tempora eradicationis et post eradicationem.
Potentiale huius studii impedimentum est quod bioexperimentum CDC in ampulla ad susceptibilitatem metiendam usi sumus, sed omnes comparationes resultatis ex studiis prioribus, instrumento bioexperimenti WHO utentibus, usurpaverunt. Resultatus ex duobus bioexperimentis directe comparabiles non esse possunt, quia bioexperimentum CDC in ampulla reductionem (knockdown) in fine periodi diagnostici metitur, dum instrumentum bioexperimenti WHO mortalitatem 24 vel 72 horis post expositionem metitur (hoc posterius pro compositis tarde agentibus) [35]. Alia potentiale impedimentum est numerus vicorum IRS in hoc studio comparatus cum uno vico non-IRS et uno vico non-IRS/prioris IRS. Non possumus assumere gradum susceptibilitatis vectoris culicum observatum in singulis vicis in uno districtu repraesentativum esse gradus susceptibilitatis in aliis vicis et districtibus in Bihar. Cum India in phasem post-eliminationis virus leucaemiae intrat, necesse est significantem progressionem resistentiae impedire. Celeris monitoratio resistentiae in populationibus flebotomum ex diversis districtibus, regionibus et areis geographicis requiritur. Data in hoc studio exhibita sunt preliminaria et verificanda sunt per comparationem cum concentrationibus identificationis a Societate Mundi Sanitaria publicatis [35] ut accuratior idea de statu susceptibilitatis P. argentipes in his regionibus obtineatur antequam programmata moderationis vectoris modificentur ad populationes phlebotomum humiles conservandas et eliminationem virus leucaemiae sustinendam.
Culicem *P. argentipes*, vector virus leucosis, fortasse prima signa resistentiae ad cypermethrinum valde efficax ostendere incipiet. Regularis observatio resistentiae insecticidarum in populationibus feris *P. argentipes* necessaria est ad effectum epidemiologicum interventionum vectoris coercendi conservandum. Rotatio insecticidarum cum diversis modis actionis et/vel aestimatio et registratio novorum insecticidarum necessaria est et commendatur ad resistentiam insecticidarum administrandam et eliminationem virus leucosis in India sustinendam.
Tempus publicationis: XVII Kalendas Februarias, anno MMXXXV